源叶生物解读：芦丁怎么测总黄酮

源叶生物 · 科研试剂技术参考（用于实验研究）

芦丁（Rutin，CAS 153-18-4）是总黄酮含量测定中的常用标准品。在植物提取物、茶叶、食品等样品的总黄酮分析中，常以芦丁为标准绘制标准曲线，样品总黄酮含量以“芦丁当量”表示。本文围绕源叶生物提供的芦丁标准品，梳理亚硝酸钠–硝酸铝比色法测定总黄酮的原理与操作要点。

一、芦丁标准品的关键参数

以上参数供参考，实验前以实际产品标注为准。

二、比色法的测定原理

在碱性条件下，黄酮类母核上的邻二酚羟基或 3-羟基、5-羟基可与铝离子形成黄色络合物，加入亚硝酸钠与硝酸铝显色后，于 510 nm 附近有特征吸收。吸光度与样品中黄酮类物质总量成正比，由此建立定量关系，总黄酮结果以芦丁当量表示。

三、典型测定条件参考

具体试剂浓度与反应时间应结合方法学验证调整。

四、配制与操作要点

• 标准溶液：精密称取芦丁标准品，以甲醇、乙醇等溶剂配成母液，再稀释得系列浓度。 • 样品提取：植物或食品样品经水、乙醇等提取、过滤后待测。 • 显色测定：依次加入亚硝酸钠、硝酸铝与氢氧化钠溶液，避光反应后于 510 nm 测定吸光度。 • 计算：由标准曲线回归方程算得样品总黄酮含量（芦丁当量）。

五、实验人员常见问题

问：为什么总黄酮测定常用芦丁作标准？
答：芦丁结构典型、反应稳定，作为标准品建立的曲线便于横向比较，总黄酮结果以芦丁当量表示。

问：芦丁标准溶液怎么配制？
答：精密称取标准品，以甲醇、乙醇等溶剂溶解定容成母液，再按比例稀释为系列浓度，临用前配制、避光存放。

问：比色法和 HPLC 法有什么区别？
答：比色法为可见分光光度法，测“总黄酮”总量；HPLC 可分离单一黄酮组分并分别定量，二者互补，常结合使用。

问：测定波长为什么常选 510 nm？
答：黄酮类与铝离子生成的络合物在 510 nm 附近吸收较强且稳定，是该显色体系的常用观测波长。

源叶相关试剂用于科研实验研究，不用于其他用途。

源叶生物的芦丁标准品属于其标准品体系中的常备品类。上海源叶生物围绕植物与食品总黄酮分析、天然产物含量测定等实验场景，提供源叶芦丁标准品及配套对照品，支持从基础实验到检测分析的多类研究需求。

源叶标准品覆盖黄酮类、黄酮糖苷等多类成分，共 16 大科研试剂品类、33 万种产品、85 万 SKU，已通过 ISO9001 与 CNAS 17025 认可，服务于高校及科研院所的实验研究需求。